โครมาโตกราฟีแบบโฟกัสซิง (chromato focusing chromatography) เป็นการแยกชนิดของโปรตีน ตามสมบัติของค่าจุดไอโซอิเล็กทริก (Isoelectric point ; pI) และความสามารถในการแลกเปลี่ยนประจุ เป็นการรวมข้อเด่นของเทคนิคไอโซอิเล็กทริกโฟกัสซิง และโครมาโตรกราฟีแบบแลกเปลี่ยนประจุเข้าด้วยกัน โดยสามารถใช้แยกสารที่มีความแตกต่างของค่า pI ได้ถึงระดับ 0.04 - 0.06 หน่วยพีเอช และสามารถใช้กับปริมาณสารตัวอย่างในระดับหลายร้อยมิลลิลิตรได้

โครมาโตโฟกัสซิงถูกคิดค้นขึ้นในปีค.ศ. 1977 โดยการทดลองทำให้เกิดความแตกต่างของค่าพีเอช (pH) ภายในคอลัมน์ของการแลกเปลี่ยนประจุ พบว่าโมเลกุลของโปรตีนแสดงค่าประจุสุทธิต่างกันไปตามค่าพีเอชภายในคอลัมน์ ที่ค่าพีเอชสงูกว่าค่า pI ประจสุทธิบนโมเลกุลโปรตีนแสดงประจุลบ และที่ค่าพีเอชตํ่าแสดงค่าเป็นบวก ดังนั้นโปรตีนจึงเกิดการเคลื่อนที่ไปเรื่อยๆ  ลงมาตามความยาวของคอลัมน์จนกระทั่งเลยจุดที่ค่าพีเอชเท่ากับค่า pI ของโปรตีน ประจุสุทธิจะกลายเป็นประจุตรงกันข้ามกับเมื่อตอนเริ่มต้น สามารถเกิดการแลกเปลี่ยนประจุจับกับตัวแลกเปลี่ยนประจุในคอลัมน์ได้ ดังนั้นตำแหน่งของการเกิดแรงกระทำ ระหว่างโปรตีนและตัวแลกเปลี่ยนประจุของโปรตีนแต่ละชนิด จะแตกต่างกันไป ทำให้สามารถแยกสารออกจากกันได้

Reference

การแยกและทำ โปรตีนให้บริสุทธิ์โดยเทคนิคโครมาโตรโฟกัสซิง